純化大腸桿菌

(1)原理

在培養基上將細菌稀釋或分散成單個細胞，使其長成單個的菌落，這個菌落就是純化的細菌菌落。

(2)微生物接種方法

平板劃線法：

平板劃線法中細胞的分離和稀釋過程發生在接種環在固體平板表面上的劃線和移動過程中。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數逐漸減少，最后可能形成純種的單個菌落(如圖，教材用的是第二種方法)。

劃線操作時注意：

用接種環取菌種之前、每次劃線之前和劃線結束都要進行灼燒滅菌，灼燒后要在酒精燈附近冷卻后再操作。

第一次灼燒操作是殺死接種環上原有的微生物，每次劃線之前灼燒是殺死上次劃線后接種環上殘留的菌種，使下次劃線的菌種直接來源于上次劃線的末端。劃線結束后灼燒是為了殺死接種環上殘存的菌種，避免細菌污染環境和感染操作者。

劃線時不要劃破培養基，如果采用分段劃線法操作從第二次操作應總在上一次劃線末端開始，首尾不能相連;操作始終在酒精燈火焰旁進行。

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